光呼吸是一個(gè)復(fù)雜的代謝過程,,其關(guān)鍵酶促步驟分布在五個(gè)亞細(xì)胞器,,氨基酸代謝是各個(gè)細(xì)胞器之間的重要紐帶。擬南芥和水稻ER-ANT1功能缺失突變體表現(xiàn)出典型的光呼吸表型,,在自然條件下生長(zhǎng)遲緩甚至致死,,但在高CO2條件下得以生存。然而,,ER-ANT1在光呼吸和氨基酸代謝中的作用尚不清楚,。
近日,佛山大學(xué)聯(lián)合廣西壯族自治區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)院,、廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院和華南農(nóng)業(yè)大學(xué)在The Crop Journal在線發(fā)表了題為“Endoplasmic reticulum adenylate transporter activity affects amino acid metabolism under photorespiratory conditions”的研究論文,,本研究對(duì)水稻er-ant1突變體在自然條件(光呼吸條件),、高CO2條件下(非光呼吸條件)以及從高CO2水平向自然條件過渡過程中的游離氨基酸進(jìn)行了全面的代謝分析。本研究闡明了ER-ANT1調(diào)節(jié)光呼吸氨基酸代謝的分子生理機(jī)制,,為依賴于光呼吸的能量代謝途徑提供了新見解,。
水稻er-ant1突變體生長(zhǎng)遲緩,,氨基酸代謝異常,,但在高二氧化碳條件下(1.5% CO2)突變體大多數(shù)氨基酸含量與野生型并無(wú)顯著差異(圖1)。為了更好地了解er-ant1突變體光呼吸表型相關(guān)的代謝變化,,作者檢測(cè)了在高二氧化碳條件下生長(zhǎng),,然后轉(zhuǎn)移到自然條件下(~0.4% CO2),其葉片的游離氨基酸含量,。野生型和er-ant1在0 h時(shí)的游離氨基酸總含量相似,。然而,轉(zhuǎn)移到自然條件后,,野生型和er-ant1葉片的氨基酸含量發(fā)生了不同的變化,。其中,谷氨酸(Glu),、谷氨酰胺(Gln)和丙氨酸(Ala)含量減少,;絲氨酸水平初期降低,而一周后絲氨酸積累(圖2),。丙氨酸:乙醛酸氨基轉(zhuǎn)移酶AGAT是甘氨酸合成途徑的關(guān)鍵酶,,可催化丙氨酸到甘氨酸的轉(zhuǎn)化。AGAT1是一個(gè)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)定位蛋白,,在er-ant1突變體中表現(xiàn)出更高的活性,,這可能是丙氨酸水平降低,甘氨酸(Gly)大量積累的原因(圖2),。
圖1 野生型和突變體er-ant1植株表型及其葉片氨基酸含量
來(lái)自光呼吸的甘氨酸是葉片中NADH的主要來(lái)源,。作者測(cè)定了野生型和er-ant1在CO2轉(zhuǎn)換過程中NAD+和NADH的豐度,結(jié)果表明在高CO2條件下,,野生型和er-ant1之間NADH無(wú)差異,,而er-ant1突變體的NAD+比野生型低。轉(zhuǎn)移到自然條件后,,野生型NADH升高,,而er-ant1突變體中更高;野生型中NAD+含量增加,,而er-ant1突變體中NAD+幾乎無(wú)變化(圖3),,這說(shuō)明在er-ant1突變體中NAD+代謝模式發(fā)生改變。上述結(jié)果表明,,ER-ANT1缺乏影響NAD+代謝,,導(dǎo)致NADH/NAD+比值升高,。
圖2 不同光呼吸條件下野生型與er-ant1突變體游離氨基酸含量的比較
圖3 野生型和er-ant1型植物在CO2轉(zhuǎn)化過程中NAD+和NADH含量的變化
作者提出了一個(gè)ER-ANT1影響光呼吸過程中氨基酸代謝的模型(圖4)。光呼吸代謝涉及各個(gè)氨基酸在不同細(xì)胞器中的產(chǎn)生和運(yùn)輸,。甘氨酸在過氧化物酶體中由丙氨酸/谷氨酸:乙醛酸氨基轉(zhuǎn)移酶合成,,隨后轉(zhuǎn)移到線粒體。在線粒體中,,甘氨酸被氧化為絲氨酸,、NADH和其他化合物;其中NADH參與線粒體氧化磷酸化,,產(chǎn)生ATP,。這些來(lái)自線粒體的ATP經(jīng)ER-ANT1轉(zhuǎn)運(yùn)到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。ER-ANT1功能喪失引起氧化磷酸化解偶聯(lián),,導(dǎo)致NAD+降低,,NADH/NAD+比值升高,從而抑制甘氨酸脫羧酶復(fù)合物(GDC)活性,。ER-ANT1缺失阻礙了植物的光呼吸代謝,,限制了ATP轉(zhuǎn)運(yùn)及利用,暗示植物中可能存在依賴于光呼吸的能量代謝途徑,;ER-ANT1缺失引起NADH/NAD+比值增加,,導(dǎo)致GDC活性降低,甘氨酸分解受阻,,從而減少了絲氨酸等下游代謝產(chǎn)物,。上游底物丙氨酸和谷氨酸沒有增加,表明ER-ANT1缺乏不影響過氧化物酶體中甘氨酸的合成,。
圖4 光呼吸過程中能量代謝,、NADH/NAD+比值、PLP合成和氨基酸代謝之間的相互作用
農(nóng)業(yè)與生物工程學(xué)院的李潔鈮和宋雨昕為該文共同第一作者,,張向前教授為通訊作者,,廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院欒鑫副研究員和華南農(nóng)業(yè)大學(xué)已畢業(yè)博士研究生茍亞軍、廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)院張?jiān)滦?/b>和秦鋼研究員參與了相關(guān)研究,。該研究得到國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31671594)和廣東省基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究基金(2024A1515011098, 2021A1515012482)的資助,。
The Crop Journal 是中國(guó)科協(xié)主管,中國(guó)作物學(xué)會(huì),、中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所和中國(guó)科技出版?zhèn)髅焦煞萦邢薰竟餐鬓k的學(xué)術(shù)期刊,,2023年的SCI影響因子為6.0,在JCR農(nóng)學(xué)和植物學(xué)兩個(gè)學(xué)科位于Q1區(qū),,并位列中科院分區(qū)農(nóng)林類期刊一區(qū),。
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